Р53-ассоциированный цитоплазматический белок (Parc) и малая интерферирующая РНК (миРНК) повреждает местонахождение р53 и изменяет биологию фибробластов при болезни Пейрони

ЦЕЛЬ: оценить влияение р53-ассоциированного цитоплазматического белка (Parc) и малой интерферирующей РНК (миРНК) на локус р53, и на биологию фибробластов, полученных из бляшки при болезни Пейрони (БП) после нокдауна по белку Parc. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ: Ткань бляшки была иссечена у мужчин со стабильной БП, подвергшихся реконструктивной операции, и использовалась для получения культуральных фибробластов, происходящих из бляшки. Затем использовались иммунофлуоресцентный анализ (ИФА) и полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ПЦР-ОТ) для определения расположения р53 и Parc до и после миРНК. Исследование ядерного фракционирования применялось для оценки хронологии транслокации р53 из цитоплазмы в ядро при нокдауне по белку Parc. Оценка терминальной трансферазы концевого уридин-трифосфата (TUNEL) использовалась для исследования апоптотического индекса фибробластов при БП после нокдауна по белку Parc. РЕЗУЛЬТАТЫ: ИФА и ПЦР показали высокие цитоплазматические уровни р 53 и Parc перед миРНК. При ИФА, р53 либо вообще не присутствовал в ядре, либо имелся в маленьких количествах до нокдауна по Parc. После Parc-миРНК, ИФА показал транслокацию р53 в ядро фибробластов, в то время как уровень Parc значительно снижался, но данный белок был сосредоточен в цитоплазме и не был представлен в ядре. Исследование ядерного фракционирования с использованием ПЦР, подтвердил наличие транслокации и показало хронологию событий. Весь белок р53 перемещается из цитоплазмы в ядро в течение 16 часов при помощи Parc-миРНК. TUNEL-анализ показал резкое возрастание процессов апоптоза после появления Parc-миРНК. ВЫВОДЫ: Эти данные свидетельствуют о том, что Parc является цитоплазматическим якорем для р53 в фибробластах, происходящих из бляшки при болезни Пейрони, и может быть основной причиной стабилизации и утраты функции р53 в этих клетках. Эти данные подтверждают роль Parc как новой мишени для фармакотерапии БП, возможно, и с использованием человеческой миРНК технологии доступной для коммерческого использования..

Тематики и теги

Болезнь Пейрони

Тематики и теги

Комментарии