А.Х. Тамбиев, С.И. Гамидов, Т.В. Шатылко, А.О. Токарева, В.В. Чаговец, Т.Б. Бицоев, Н.Л. Стародубцева, А.Ю. Попова, В.Е. Франкевич
Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова, Москва
Семенная плазма является потенциальным источником новых молекулярных маркеров, обладающих диагностической и прогностической ценностью при мужском бесплодии. В частности, востребован поиск биомаркеров, позволяющих прогнозировать успех микродиссекционной биопсии яичек (MicroTESE) у пациентов с необструктивной азооспермией (НОА). Мы провели полуколичественный анализ протеома и липидома семенной плазмы, полученной у пациентов с НОА, и сопоставили его результаты с эффективностью MicroTESE.
Целью нашего исследования являлось улучшение результатов хирургических методов получения сперматозоидов у пациентов с азооспермией за счет поиска новых прогностических факторов в семенной плазме.
Для протеомного анализа использованы образцы семенной плазмы от 36 мужчин с НОА, для липидомного анализа – от 64 мужчин с НОА. Клиническое обследование включало сбор анамнеза пациента, оценку уровня гормонов в сыворотке крови (ФСГ, ЛГ, пролактин, тестостерон, эстрадиол, ингибин В), генетическое тестирование (кариотип и ультразвуковое исследование мошонки с допплерометрией). Всем пациентам была выполнена процедура microTESE. Для оценки протеома и липидома была проведена масс-спектрометрия образцов семенной плазмы. Хромато-масс-спектрометрические данные полуколичественного анализа без меток обрабатывались с помощью программного обеспечения MaxQuant, поиск и идентификация белков и пептидов проводились по базе данных SwissProt.
Полуколичественный анализ без меток с использованием подхода «снизу вверх» выявил 405 различных белков, среди которых во всех образцах было обнаружено 174 белка. Т-тест Уэлча с поправкой Бонферрони (р<0,01) привел к идентификации 18 достоверно дифференцированно экспрессируемых белков у пациентов с положительным и отрицательным результатом MicroTESE: AZGP1, BASP1, CD9, CST3, CST4, IGHA1, IGHG1, IGHG2, IGKC, MME, NUCB2, ORM2, PIP, PSAP, SEMG2, SPINK2, SPOCK1, TF. При анализе данных липидома семенной плазмы статистически значимыми предикторами обнаружения сперматозоидов при microTESE оказались содержание липида SM d16:1/18:0 (отношение вероятностей [ОВ]: 7.23e-04; 95% доверительный интервал [ДИ]: от 6.59e-06 до 7.93e-02), содержание липида TG 14:1_16:0_18:3 (ОВ: 1.92e+01; 95% ДИ: от 2.66e+00 до 1.39e+02).
Протеомный и липидомный профиль семенной плазмы пациентов с остаточным сперматогенезом при НОА отличается от такового у пациентов с полным отсутствием сперматогенеза. Существуют ряд белков-кандидатов и панель липидов, которые после валидации могут быть использованы в будущем для определения репродуктивного прогноза у таких пациентов.
Комментарии