Ex vivo фотодинамическая диагностика для выявления злокачественных клеток в браш-биопсиях полости рта

Hamad LO, Vervoorts A, Hennig T, Bayer R. Стоматологический факультет, Триполи, Ливия. lailahamadi@yahoo.com В этом исследовании мы доказали эффективность фотодинамической диагностики (ФДД) при выявлении минимального количества злокачественных клеток ex vivo. Цель этой работы состояла в том, чтобы ответить на вопрос – сможет ли комбинация ФДД и щеточной биопсии полости рта стать подходящим инструментом для ранней диагностики карциномы полости рта. Небольшое количество (100-500) клеток мелкоклеточного рака легких человека (ОАТ 75), переходно-клеточного рака мочевого пузыря (SW1710) и эмбриональных клеток почек человека (HEK293) – были инкубированы с 2 мМ 5-аминолевулиновой кислоты. Кроме того, были подготовлены 50 щеточных биопсий, взятых у добровольцев. После 2 и 3 часов инкубации, все образцы были исследованы посредством спектрофлюорометрии. Измерения были выполнены в капиллярах. Для возбуждения (405 нм) и обнаружения спектров флюоресценции, использовалась система микрозонд-спектрофлюорометр (волокно 400 микрон). Для того, чтобы обнаружить типичный спектр протопорфирина IX, необходимо минимум 100 злокачественных клеток и 3 часа инкубации с 5-аминолевулиновой кислотой. Некоторые образцы эпителия, полученные при щеточной биопсии, показали сильную аутофлюоресценцию протопорфирина IX (связанную с бактериями), которая увеличилась после инкубации с 5-аминолевулиновой кислотой. При тестировании различных антибиотиков и антисептиков выяснилось, что 0.4 мМ хлоргексидина значительно уменьшали флюоресценцию в щеточных биопсиях здоровых добровольцев, тогда как флюоресценция злокачественных клеточных линий снижалась минимально. Эксперименты показали, что посредством оптического микрозонда может быть выявлено небольшое количество раковых клеток (100). Добавление хлогексидина перед инкубацией щеточных биопсий полости рта с 5-аминолевулиновой кислотой повышает надежность теста, значительно снижая аутофлюоресценцию вследствие присутствия бактерий. Таким образом, возможна диагностика эпителиальной карциномы в присутствии пациента.

Тематики и теги

Фотодинамика в урологии

Экспериментальная урология

Ex vivo фотодинамическая диагностика для выявления злокачественных клеток в браш-биопсиях полости рта

Тематики и теги

Комментарии