Shaofeng Wu, Zhan Wang, Shantaram Bharadwaj, Steven J. Hodges, Anthony Atala, Yuanyuan Zhang
Цель
Мы оценили эффект гиперэкспрессии эндотелиального фактора роста сосудов на выживаемость стволовых клеток, полученных из мочи, а также на миогенную дифференцировку для определения: могут ли эти клетки быть использованы как новый источник для реконструктивно-пластических операций на мочеполовой системе.
Материалы и методы
Стволовые клетки мочи были выделены из 31 образца мочи от 6 здоровых людей в возрасте от 3 до 27 лет. В стволовые клетки, полученные из мочи, вводился аденовирусный вектор, содержащий ген VEGF мыши. Затем эти клетки смешивали с эндотелиальными клетками пупочной вены человека в геле, содержащем коллаген I типа (общее количество 5 × 106). Эти клетки, содержащие гель, были имплантированы подкожно наряду с 6 другими контрольными 18 мышам с отсутствием тимуса. Лоскуты были оценены через 28 дней после инъекции по размеру и иммуногистохимически.
Результаты
Уровень эндотелиального фактора роста сосудов в культуре стволовых клеток, полученных из мочи, достигал пикового значения на 10 день после инъекции. Лоскуты, полученные из стволовых клеток, содержащих аденовирусный вектор гена VEGF мыши и эндотелиальные клетки пупочной вены человека, были больше и лучше васкуляризированы по сравнению контрольной группой. Кроме того в лоскутах, экспрессирующих эндотелиальный фактор роста, была отмечена большая экспрессия ядерных маркеров человека. Лоскуты, содержащие эндотелиальный фактор роста сосудов, также содержали больше клеток, экспрессирующих эндотелиальные маркеры CD-31 и фактор фон Виллебранда, а также маркеры гладкомышечных клеток (α-гладкомышечный актин, десмин и миозин). Также в лоскутах, полученных из стволовых клеток мочи, содержащих ген VEGF плюс эндотелиальные клетки пупочной вены человека, было выявлено большее количество нервных волокон по сравнению с контрольной группой.
Заключение
Гиперэкспрессия эндотелиального фактора роста сосудов в сочетании с введением эндотелиальных клеток увеличивает in vivo выживаемость и миогенную дифференцировку стволовых клеток, выделенных из мочи. Также в имплантированном лоскуте повышена неоваскуляризация и регенерация нервов.
Комментарии